微量凯氏定氮器的改良
蛋白质的定量测定是生物化学实验的重要内容之一。方法有多种,其中,凯氏定氮法一直是蛋白质定量测定的经典方法,以其准确性高、操作简单迅速而被广泛采用,被列为高校生化实验的必做内容之一,在食品工业和饲料工业被指定为法定的蛋白质测定方法。
凯氏定氮法自创立以来做过多次改良,分为常量凯氏定氮和微量凯氏定氮,蒸馏器有分散式的和改良式的,后者又有立体式和平面式之分。现广为采用的是1767-立体改良式凯氏定氮器。经过多次改良后,定氮器的结构、可操作性和准确性都大有提高,但仍有许多不足之处。如①蒸馏瓶太短,压力不容易控制,在沸腾时样品混合液极易冲出蒸馏瓶进入接收瓶;②接收瓶中的接收液易于倒吸入蒸馏瓶中,对热源稳定性要求高。为此,在多次实验和分析的基础上,对1767-改良式凯氏定氮器作进一步改良如下:
(1)
整套仪器的高度由原来350mm增加到450mm。新增加的高度100mm按原来各部分的比例进行分配;(2)
在蒸馏瓶的中部和上部各增加一个膨大区C和E,起缓冲作用。在产气瓶相应的部位也增加一个膨大D,原来蒸馏瓶和产气瓶的底部也稍加膨大,C和D分别与B与A等大。E稍小于D。(3)
冷凝瓶G下部增加一个空腔F,以容纳倒吸入的接收液,防止接收液进入蒸馏瓶。改良后的蒸馏器已经试产成功。经实际操作证明,进一步改良后的蒸馏器具有热稳定性好,压力易于控制和抗暴沸等优越性。在
50个样品的测定试验中,只有一例发生暴沸,成功率高达98%。
黄步军等,生物学通报,
1996年第5期
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